Banca de DEFESA: JONATHAS DIEGO LIMA SANTOS

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : JONATHAS DIEGO LIMA SANTOS
DATA : 15/12/2017
HORA: 13:00
LOCAL: Sala Carl Peter von Dietrich - Departamento de Bioquímica
TÍTULO:

 

 

 

ANÁLISE PROTEÔMICA DE CHROMOBACTERIUM VIOLACEUM SUBMETIDA À MICROGRAVIDADE SIMULADA

 

 

 

PALAVRAS-CHAVES:

Bactéria, microgravidade, , proteoma e rede de interação.

PÁGINAS: 150
RESUMO:

CChromobcterium violaceum (C. violaceum) é uma bactéria Gram-negativa, encontrada em regiões tropicais e subtropicais. Alguns estudos proteômicos realizados com esta bactéria demonstraram sua capacidade de adaptação a desafios ambientais, como alta concentração de ferro e exposição ao estresse oxidativo. No entanto, nenhum estudo foi feito com esta espécie submetida à microgravidade simulada (MGS). MGS refere-se a condições em que a gravidade é artificialmente reduzida para menos de 1xg. A Vida na Terra evoluiu em 1xg e em estudos MGS é importante para entender as mudanças globais que os organismos podem enfrentar nas viagens espaciais. Portanto, o objetivo deste estudo foi caracterizar a resposta de C. violaceum, como organismo modelo de vida livre, cultivado em MGS, usando técnicas de proteômica para entender como a bactéria responde a esse estresse. A MGS foi conseguida por meio da rotação do vessel ao redor do eixo horizontal perpendicular ao vetor gravitacional nos sistemas de cultura de células rotativas - Rotating Cell Culture Systems – (RCCS4). MGS foi conduzido a uma velocidade de 40 rpm por um período de 12 horas para obter a curva de crescimento a cada 2 horas. A extração total de proteína foi realizada em dois momentos: 5 e 12 horas, correspondendo a fase exponencial inicial (MG5) e tardia (MG12), respectivamente, utilizando a curva de crescimento como referência. Após a tripsinização, as amostras foram analisadas com o espectrômetro de massas Q-TOF. Ao comparar a quantidade de proteínas identificadas entre a fase exponencial inicial (5 horas) e tardia (12 horas), detectamos 212 proteínas durante 5h de crescimento e 192 durante 12h, das quais 144 delas são comuns em ambos os períodos. Quando se observa em MG5 155 proteínas foram detectadas, das quais 18 proteínas foram upreguladas, 19 downreguladas e 17 proteínas foram exclusivas de MG5 quando comparadas a GN5. Em MG12 foram identificadas 173 proteínas, das quais 17 foram upreguladas, 22 downreguladas 28 exclusivas quando comparadas ao controle. Também observamos uma diminuição do crescimento de C. violaceum no MGS quando comparado às culturas bacterianas submetidas à gravidade normal. As proteínas relacionadas com os processos transcricionais e a liberação de energia através de caminhos aeróbicos foram reguladas negativamente, enquanto as proteínas envolvidas com a inibição da transcrição, a via anaeróbia e a sobrevivência celular aumentaram sua expressão, indicando uma modulação do metabolismo e proliferação garantindo a sobrevivência da C. violaceum. MGS pode causar alterações no metabolismo respiratório, diminuição da transcrição e da tradução e, consequentemente, na proliferação de C. violaceum. Nossos dados sugerem que a MGS pode promover alterações a nível molecular como uma estratégia para manutenção e sobrevivência em ambiente de microgravidade.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - DANIEL CHAVES DE LIMA - IFRN
Interno - 1149356 - ELIZEU ANTUNES DOS SANTOS
Externo ao Programa - 2267860 - GUSTAVO ANTONIO DE SOUZA
Externo à Instituição - MAGNOLIA DE ARAUJO CAMPOS PFENNING - UFCG
Presidente - 1199127 - SILVIA REGINA BATISTUZZO DE MEDEIROS