Banca de QUALIFICAÇÃO: ANDERSON FELIPE JACOME DE FRANCA

Uma banca de QUALIFICAÇÃO de MESTRADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: ANDERSON FELIPE JACOME DE FRANCA
DATA: 05/09/2013
HORA: 10:00
LOCAL: Sala Carl Peter von Dietrich
TÍTULO:

VICILINA DE SEMENTES DA LEGUMINOSA SELVAGEM Anadenanthera macrocarpa (AmV): PURIFICAÇÃO, CARACTERIZAÇÃO, EFEITO DELETÉRIO E MECANISMO DE AÇÃO PARA BRUQUÍDEO Callosobruchus maculatus

PALAVRAS-CHAVES:

AmV, Domínios de ligação à quitina; Angico; gorgulho do feijão de corda.

PÁGINAS: 93
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Bioquímica
RESUMO:

Os grãos e as sementes de leguminosas são alimentos que compõem a base das dietas de diversas culturas ao redor do mundo, tendo uma importante contribuição nas necessidades diárias de nutrientes dos seres humanos. As globulinas 7S (vicilinas) são proteínas de reserva encontradas em sementes de leguminosas, e podem apresentam uma função adicional de defesa constitutiva do embrião contra pragas e patógenos. Neste trabalho uma vicilina de Anadenanthera macrocarpa - AmV (Angico-vermelho), foi isolada, purificada, caracterizada parcialmente, seu efeito sobre o desenvolvimento e sobrevivência larval e emergência dos adultos de Callosobruchus maculatus foi avaliado pela determinação das LD₅₀, WD₅₀ e ED₅₀ em sistema de bioensaio. A purificação da vicilina foi iniciada por cromatografia de afinidade à quitina e posteriormente em cromatografia de gel filtração no sistema de FPLC, seguida por cromatografia de fase reversa em sistema HPLC. Por SDS-PAGE, AmV dissociou-se em quatro subunidades principais de 73,64, 70,42, 43,08 e 41,20 kDa, e quando submetida à eletroforese em condições nativas apresentou uma banda única de característica eletroforética ácida. Nos bioensaios, a WD₅₀ e a LD₅₀ para as larvas foram de 0,32% e 0,33% (p/p) respectivamente, já para os adultos a ED₅₀ foi de 0,096%. O provável mecanismo de ação foi avaliado por ensaios de digestibilidade da AmV in vitro, sendo observado o envolvimento de dois fragmentos de vicilinas imunoreativos contra anticorpo policlonal Anti-vicilinas de Erythrina velutina (Anti-EvV), de 22,60 e 13,34 kDa ligantes à quitina. A AmV na sua forma nativa foi reconhecida pelo anticorpo anti-EvV, indicando que existe uma região conservada nas vicilinas e que provavelmente é correspondente à domínios de ligação à quitina. Estes resultados apontam para uma nova vicilina ligante à quitina que pode vir a ser utilizada como um possível bioinseticida de origem proteica, de maneira a controlar o inseto praga C. maculatus, bem como corroborar com achados da literatura que demonstram em vicilinas de diferentes espécies a existência de regiões conservadas ligantes à quitina ainda não caracterizados.

MEMBROS DA BANCA:
Externo à Instituição - DELANO ANÍBAL DA SILVA - UFRN
Presidente - 1149356 - ELIZEU ANTUNES DOS SANTOS
Interno - 1513597 - JOAO PAULO MATOS SANTOS LIMA