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Disertaciones |
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THIAGO ANDRÉ CIDRAL
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Resistência à linezolida em Estafilococos Coagulase Negativos resistentes à meticilina provenientes de hospitais da cidade do Natal-RN
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Líder : MARIA CELESTE NUNES DE MELO
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MIEMBROS DE LA BANCA :
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MARIA CELESTE NUNES DE MELO
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RAQUEL CORDEIRO THEODORO
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THALES ALLYRIO ARAUJO DE MEDEIROS FERNANDES
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Data: 15-ene-2016
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Resumen Espectáculo
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Os Estafilococos Coagulase Negativos (ECN) são microrganismos pertencentes à microbiota normal da pele e de mucosas dos seres humanos e de animais. A maioria das infecções causadas por ECN estão relacionadas ao uso de dispositivos médicos invasivos que ao lesionar a integridade da pele servem de base para a formação de biofilmes, um importante fator de virulência. Grande parte dos isolados de coagulase negativo são provenientes de hemoculturas e pontas de cateter e nos últimos anos vem se tornando um grave problema no que diz respeito à antibioticoterapia, em virtude do número elevado de cepas multirresistentes descritas. O objetivo deste trabalho foi pesquisar resistência à linezolida em estafilococos coagulase negativos resistentes à meticilina isolados de ponta de cateter e hemocultura de hospitais públicos e privados da cidade do Natal. Os isolados bacterianos foram coletados a partir de demanda espontânea em Hospitais Públicos e Privados. O gênero Staphylococcus foi confirmado através dos testes de rotina como coloração de Gram, prova da catalase da coagulase livre. A identificação a nível de espécie foi realizada através de testes bioquímicos convencionais. Algumas amostras tiveram sua identificação confirmada pelos sistemas VITEK 2 e MALDI-TOF. O perfil de resistência aos antimicrobianos foi avaliado através da técnica de disco-difusão (CLSI 2013). A Concentração Inibitória Mínima para vancomicina e linezolida foi determinada através do uso de E-test e a presença dos genes mecA e cfr foi confirmada pela técnica da Reação em Cadeia da Polimerase. Algumas amostras tiveram a região V da subunidade 23S do gene do rRNA sequenciadas e analisadas. Posteriormente, as mesmas foram submetidas a técnica do PFGE para determinação do seu pulsotipo. Dos 43 estafilococos coagulase negativos resistentes à oxacilina incluídos neste estudo, 33 (77%) foram identificados como S. epidermidis, 6 (14%) como S. haemolyticus, 3 (7%) como S. homins e 1 (2%) como S. capitis. Os isolados de hemocultura representaram 86% (37) e os de ponta de cateter 14% (6). As amostras apresentaram um perfil de multirresistência, uma vez que 42 dos 43 isolados apresentaram resistência à 4 ou mais classes de drogas. Todas apresentaram o gene mecA. Nenhuma amostra apresentou resistência à vancomicina. Três cepas de S. hominis e duas de S. epidermidis, apresentaram resistência à linezolida com CIM variando entre 6 e 64 µL/mL. Quando investigadas, apresentaram duas mutações pontuais (C2190T e G2603T) na região V do gene para rRNA 23S. Nenhuma destas apresentou o gene cfr. O PFGE dos S. hominis revelou a presença de um único pulsotipo em 3 hospitais, enquanto não foi encontrado semelhança genética entre os S. epidermidis. Estes achados destacam a importância da vigilância continuada em relação a resistência a linezolida no gênero Staphylococcus.
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VALBER RUDNELLY MEIRA
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Avaliação da resposta imune em ovinos após imunização com antígenos SAG1, SAG2 e SAG3 candidatos à vacina anti-Toxoplasmose.
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Líder : VALTER FERREIRA DE ANDRADE NETO
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MIEMBROS DE LA BANCA :
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ANA CARLA DIÓGENES SUASSUNA BEZERRA
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LILIAN GIOTTO ZAROS DE MEDEIROS
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VALTER FERREIRA DE ANDRADE NETO
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Data: 22-ene-2016
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Resumen Espectáculo
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A Toxoplasmose é uma zoonose cosmopolita causada pelo protozoário Toxoplasma gondii. Os ovinos, dentre os animais de produção, configuram-se como uma das espécies que apresentam uma maior susceptibilidade a este parasito, sendo um importante agente envolvido na ocorrência de abortos entre animais ruminantes, provocando perdas econômicas significantes e repercussões na saúde pública, uma vez que o consumo de produtos de origem ovina constituem-se como uma importante fonte de infecção para o homem. Neste estudo foram coletadas amostras de sangue de 90 ovinos em 02 fazendas situadas nos municípios de Macaíba e de Ceará Mirim, região metropolitana de Natal, Estado do Rio Grande do Norte. Os animais incluídos nesse estudo foram selecionados sorologicamente por ELISA e HAI e a resposta imune humoral dos ovinos imunizados com adenovírus recombinantes codificando SAGs foi avaliada por ELISA. A soroprevalência encontrada na Escola de Jundiaí foi de 50%, enquanto que na Fazenda Lanila foi de 25,6%.Provavelmente o manejo dos animais nessas fazendas está associado com a diferença de positividade observada.Os resultados preliminares mostram que nosso protocolo de imunização, avaliado 30 dias após a primeira dose, mostrou capacidade em estimular a produção de IgG total específicos contra os antígenos SAGs de T.gondii e que são importantes mecanismos de defesa principalmente do ponto de vista congênito e durante fase crônica da doença, especificamente AdSAG1, bem como não foram observadas alterações clínicas relevantes entre os animais vacinados. Estudos mais específicos são necessários para esclarecer de forma mais específica o impacto que tal regime de imunização exerce tanto na capacidade de proteção contra a parasitose e sobretudo se acarreta ou não algum dano a saúde do animal.
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JOELMA DANTAS MONTEIRO
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EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR DOS VÍRUS DENGUE E ZIKA NO ESTADO DO RIO GRANDE DO NORTE, NO PERÍODO DE JUNHO DE 2014 A MAIO DE 2015.
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Líder : JOSELIO MARIA GALVAO DE ARAUJO
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MIEMBROS DE LA BANCA :
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JOSE VERISSIMO FERNANDES
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JOSELIO MARIA GALVAO DE ARAUJO
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THALES ALLYRIO ARAUJO DE MEDEIROS FERNANDES
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Data: 26-ene-2016
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Resumen Espectáculo
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A dengue e a febre da zika são doenças causadas por vírus RNA de fita simples, polaridade positiva, pertencentes à família Flaviviridae, gênero Flavivirus e são transmitidos ao homem através da picada de vetores artrópodes hematófagos do gênero Aedes. O Estado do Rio Grande do Norte (RN) convive com o aumento do número de casos da dengue há mais de duas décadas, porém, no que concerne à febre da zika, até os primeiros dias do mês de maio deste ano, o Ministério da Saúde não havia confirmado nenhum caso da doença no Brasil, tampouco no Rio Grande do Norte. Esse trabalho objetivou analisar o perfil epidemiológico dos vírus Dengue e Zika no Estado do Rio Grande do Norte, no período de junho de 2014 a maio de 2015. Foram estudadas 396 amostras provenientes de pacientes com casos suspeitos de dengue e/ou zika, das quais, 334 amostras foram analisadas para dengue através da RT-PCR, representando 8,08% (27/334) de positividade e 348 amostras foram estudadas para Zika por meio da qRT-PCR, onde o vírus foi confirmado em 20,98% (73/348) dos casos. Os sorotipos DENV-1, DENV-2 e DENV-4 cocircularam no RN, com predominância do último, detectado em 66,67% (18/27) dos casos positivos. Os municípios de Jandaíra, Natal e Ouro Branco foram os mais acometidos por dengue, com 18,52% (5/27), 22,22% (6/27) e 11,11% (3/27), respectivamente. No que se refere ao Zika, as cidades mais atingidas foram Guamaré, Natal, Nova Cruz e Parnamirim, com 13,70% (10/73), 30,14% (22/73), 9,59% (7/73) e 19,18% (14/73) de confirmações, respectivamente. Neste estudo, o primeiro município a ter um caso confirmado de dengue foi Jandaíra. Caiçara do Rio do Vento foi o primeiro a apresentar um caso de Zika, seguido de Galinhos. Junho foi o mês mais representativo para dengue com 44,44% (12/27) dos casos confirmados, enquanto Março foi o mais acometido por Zika com 23,29% (17/73). O gênero masculino e o feminino tiveram praticamente a mesma proporção de casos positivos para dengue, com 51,85% (14/27) e 48,15% (13/27), respectivamente, enquanto o Zika acometeu um maior número de mulheres, representando 57,53% (42/73). As faixas etárias mais acometidas por dengue foram a de 11-20 e 51-60 anos, cada uma com 18,52% (5/27). No que concerne ao vírus Zika, a faixa etária de 0-10 anos foi a mais acometida com 19,18% (14/73) dos casos confirmados, seguidas das faixas de 31-40 e 41-50 anos, onde cada uma destas representou 16,44% (12/73). Em decorrência da cocirculação desses flavivírus no RN, é fundamental compreender a prevalência e a dinâmica de circulação de ambos os vírus, no intuito de estabelecer medidas para controlar futuros surtos e epidemias no Estado. Este trabalho representa o maior estudo sobre o Zika vírus no Estado do RN.
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MARIA EDUARDA DE SOUZA MENEZES DA COSTA
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Novos alvos moleculares para detecção e genotipagem de Toxoplasma gondii
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Líder : DANIEL CARLOS FERREIRA LANZA
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MIEMBROS DE LA BANCA :
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DANIEL CARLOS FERREIRA LANZA
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PAULO MARCOS DA MATTA GUEDES
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PAULA VIVIANE DE SOUZA QUEIROZ MOREIRA
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Data: 27-ene-2016
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Resumen Espectáculo
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O Toxoplasma gondii é um parasito mundialmente distribuído, que pode causar desde sintomas parecidos com a gripe até problemas neurológicos. As cepas do T. gondii apresentam grande variabilidade genética na América do Sul, sendo fundamental a análise de sequências para auxiliar no diagnóstico confiável e para classificação dos diferentes genótipos. O objetivo deste trabalho foi desenvolver dois métodos moleculares, um para detecção e o outro para genotipagem do T. gondii, possibilitando a identificação de todas as cepas conhecidas e a geração de dados que possam ser correlacionados com a virulência. Inicialmente, foi utilizado o programa MUSCLE para alinhamento de 685 sequencias nucleotídicas obtidas do GenBank, em seguida os alinhamentos foram analisados no programa MEGA 6.0 para determinação de sua variabilidade genética. O gene GRA7 foi selecionado como alvo para os iniciadores, que foram desenhados em regiões conservadas do gene utilizando os programas Geneious 9.0 e Primer BLAST. O protocolo de amplificação utilizando-se os primers para o gene GRA7 foi então comparado com outros protocolos padronizados para amplificação do gene B1 e do elemento repetitivo de 529 pb, que são os marcadores mais utilizados para o diagnóstico do T. gondii. Para o desenvolvimento do sistema de genotipagem foram selecionados os genes ROP5, ROP18 e GRA7, que estão relacionados ao mecanismo de virulência melhor descrito em T. gondii. O sistema de genotipagem desenvolvido se baseia na análise de polimorfismos presentes em fragmentos sob seleção positiva desses genes, que permite identificar cepas pertencentes as linhagens clonais e cepas atípicas. Utilizando-se essa nova abordagem para a seleção de marcadores, será necessário investigar um número de regiões do genoma consideravelmente menor que o utilizado pelo método utilizado tradicionalmente, simplificando o processo. Concluindo, o desenho de primers em regiões conservadas do gene GRA7 permitiu o desenvolvimento de um sistema de detecção utilizando PCR com excelente positividade e sensibilidade, principalmente para detecção de cepas atípicas do T. gondii. Ainda, a genotipagem baseada na detecção de polimorfismos em genes de virulência permitiu a diferenciação genotípica das diferentes cepas de forma mais simples que a técnica de RFLP utilizada atualmente.
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RENATO CÉSAR DE MELO FREIRE
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STUDY OF CULICIDIAN FAUNA AND CIRCULATING ARBOVIRUSES IN THE FLONA AÇU-RN CONSERVATION UNIT
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Líder : RENATA ANTONACI GAMA
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MIEMBROS DE LA BANCA :
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RENATA ANTONACI GAMA
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JOSELIO MARIA GALVAO DE ARAUJO
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ROSELI LA CORTE DOS SANTOS
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Data: 28-ene-2016
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Resumen Espectáculo
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Culicids are fundamental parts in the transmission of several pathogens which makes this family of dipterans of great medical importance. One branch for understanding how these diseases can be controlled is the study of the vectors that transmit them. Therefore, the importance of carrying out studies that deal with the investigation of these vectors in areas that have not yet been explored, such as conservation units, that can house these pathogens. The objective of this work was to carry out a survey of the species of culicidae in the Caatinga and the possible presence of circulating arboviruses. Methodology: Mosquito collections were carried out from September 2011 to August 2013 in the National Forest of Açu-RN. Three types of traps were used: Ovitrampa, Larvitrampa and Shannon Trap, in order to collect the forms of egg, larva and adults respectively. The individuals collected were individually identified using specific morphological keys and the adults were submitted to viral identification, through the extraction of viral RNA, RT-PCR and sequencing of viruses. Results and Discussion: Eight genera of the Culicidae family were collected: Aedes, Aedeomyia, Anopheles, Coquillettidia, Culex, Haemagogus, Mansonia and Ochlerotatus. The Ovitrampa and Larvitrampa traps captured A aegypti, A albopictus, Haemagogus spegazzini, Culex (Culex) sp, being more positive in the points that approach the urban area surrounding Flona, among the species collected the most abundant was A. aegypti. In the Shannon trap, seventeen species were identified and the most abundant was Ochlerotatus scapularis involved in the transmission of the arboviruses Melon virus, Ilhéus virus, Rocio virus and Venezuelan Equine Encephalitis do Leste virus. Two new records were found belonging to the subfamily Culicinae: Mansonia pseudotitillans, and Culex (culex) chidesteri. The latter was first encountered with the Culex Flavivirus (CxFv) virus. CxFv has no medical importance, it is a specific virus of the Culex genus. These data show how much they still have to reveal about the Caatinga domain of Rio Grande do Norte. Conclusion: This work brings an alert for the preservation of the conservation units, because once these environments are degraded they can cause the exposure of pathogens to people's lives, since there are several vectors maintained in the environment.
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CÁSSIO RICARDO DE MEDEIROS SOUZA
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Líder : JANEUSA TRINDADE DE SOUTO
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MIEMBROS DE LA BANCA :
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JANEUSA TRINDADE DE SOUTO
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LILIAN GIOTTO ZAROS DE MEDEIROS
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CELINA MARIA PINTO GUERRA DORE
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Data: 29-ene-2016
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Resumen Espectáculo
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TAMYRES BERNADETE DANTAS QUEIROGA
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AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO DE RECEPTORES DA IMUNIDADE INATA DURANTE A INFECÇÃO EXPERIMENTAL PELO TRYPANOSOMA CRUZI UTILIZANDO CEPAS/ISOLADOS COM DIFERENTES GRAUS DE VIRULÊNCIA E PATOGENICIDADE
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Líder : PAULO MARCOS DA MATTA GUEDES
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MIEMBROS DE LA BANCA :
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PAULO MARCOS DA MATTA GUEDES
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ANTONIA CLAUDIA JACOME DA CAMARA
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CLÉBER DE MESQUITA ANDRADE
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Data: 29-ene-2016
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Resumen Espectáculo
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Estudos recentes têm demonstrado a importância de receptores do tipo Toll (TLRs) e do tipo NOD (NLRs) na resistência à infecção experimental pelo Trypanosoma cruzi. Entretanto, não existem trabalhos que correlacionem a expressão diferencial desses receptores em camundongos durante à infecção por cepas com diferentes graus de virulência e patogenicidade. Com a finalidade de compreender melhor o papel desses receptores na resistência ou susceptibilidade à infecção experimental pelo T. cruzi, camundongos Swiss Webster foram infectados com 1x104 tripomastigotas sanguíneos das cepas/isolados pertencentes aos seis grupos genéticos: Colombiana (Tc-I), Y (Tc-II), PL 1.10.14 (Tc-III), AM 64 (Tc-IV), 3253 (Tc-V) e CL (Tc-VI). Características biológicas inerentes as diferentes cepas/isolados foram avaliadas (parasitemia, sobrevivência e polimorfismo de formas tripomastigotas), juntamente com a expressão de receptores da imunidade inata (TLR1, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR6, TLR7, TLR8, TLR9, NOD1, NOD2 e NALP3), suas moléculas adaptadoras (TRIF, MyD88, RIP2, ASC e Caspase-1), citocinas (IL-1β, IL-6, IL-10, IL-12p35, IL-12p40, IL-18, IFN-g e TNF-α) e da enzima iNOS em tecido muscular cardíaco. As cepas Y e Colombiana apresentaram os maiores picos de parasitemia e geraram 100% de mortalidade nos animais. A cepa CL e o isolado PL 1.10.14 apresentaram picos intermediários de parasitemia e geraram 70% de mortalidade nos camundongos infectados. Por outro lado, a cepa AM64 e o isolado 3253 geram os menores picos de parasitemia e 100% dos animais sobreviveram a infecção. Animais infectados com as cepas Y e Colombiana do T cruzi, cepas muito virulentas e patogênicas, apresentam elevada expressão de RNAm de NALP3, caspase-1, IL-1β, TNF-α e iNOS na musculatura cardíaca. Por outro lado, apresentam redução na expressão de RNAm de TLR4, TLR5, TLR9, TRIF, IL-6 e IL12p35 quando comparado aos demais grupos de animais infectados com cepas que apresentam menor virulência e patogenicidade. Ainda foi observado uma correlação negativa entre a expressão de RNAm de TLR4 e IL-6 e a quantidade de formas tripomastigotas sanguíneas. Os dados sugerem que as cepas Y e Colombiana, virulentas e patogênicas, induzem a inibição na expressão de RNAm de TLR4, TLR5, TLR9 e TRIF e levam ao aumento na expressão de RNAm de NALP3, caspase-1, IL-1β, TNF-α e iNOS na musculatura cardíaca podendo contribuir para a susceptibilidade a infecção.
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PAULA BLANDY TISSOT BRAMBILLA
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IMPROVEMENT OF THE VERTICAL OLFATOMETER: A NEW TOOL FOR BEHAVIORAL STUDIES OF HEMATOPHAGIC INSECTS USING AS AN EXPERIMENTAL MODEL Anopheles aquasalis (Diptera: Culicidae)
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Líder : RENATA ANTONACI GAMA
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MIEMBROS DE LA BANCA :
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RENATA ANTONACI GAMA
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PAULO MARCOS DA MATTA GUEDES
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KELLY DA SILVA PAIXÃO
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Data: 05-feb-2016
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Resumen Espectáculo
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Mosquitoes of the Anopheles genus are vectors of Plasmodium that cause human malaria, the development of new tools, methods and techniques to combat malaria transmission are a priority. In order to develop new ways of fighting the mosquito, we must understand its search behavior for the host, which is the main link in the transmission of the disease. Olfactometers are a simple and reliable way to obtain behavioral responses from insects, when used specifically for the tested insect. Widely employed in the study of agricultural entomology for pest control, however in Brazil the study with olfactometry and insect vectors is scarce. Due to the eminent importance of the development of new means to block the transmission link of pathogens from mosquitoes to humans, it is essential to optimize tools that help us to understand the behavior of the vector. Aiming this, the study had as objective the development of a vertical olfactometer with airflow for anemotaxic hematophagous insects using the species Anopheles aquasalis as a model for behavioral studies. The existence of the device was verified on the basis of worldwide public patents, later the olfactometer was developed, based on already existing olfactometers, implemented with airflow and video system, so that it would be suitable for anemotaxic insects, as described in the literature. Tests were carried out with 3 different cameras, absence and presence of airflow, smoke tests and indiscriminate bioassays with keratomone octenol and animals. In order to evaluate the functioning of the olfactometer and its implementations. As a result, we can observe that there are no specific olfactometers for A. aquasalis, nor for the genus Anopheles, and no vertical olfactometer with airflow to evaluate the olfactory response of anemotaxic insects. We observed that odor plumes generated in the water vapor smoke test are much denser, being more appropriate for evaluating the odor plume structure than those generated by acetic acid and ammonia hydroxide, in addition to being non-toxic and inexpensive . Regarding the implementations, we noticed that the GoPro Hero 3+ camera showed superior performance to the others tested, clearly assessing movements of attraction and activation of mosquitoes; the air flow generated turbulence in the odor plume tests, making diffusion active rather than passive. In the indiscriminating bioassays with octenol, we observed that rates of 15mg / h have a higher mean of attractiveness (66.66%) compared to 14mg / h (33.33%) and 18mg / h (0%), demonstrating that there is a relationship between the volatilization rate and number of insects attracted (p <0.05); with different hosts we observed that there was no relationship (p = 1.00) between different species and attractiveness of A aquasalis. It is concluded that the development of a specific tool to evaluate the behavior of anemotaxic insects that make blood-sucking insects makes the results more reliable, since the device is specific for insects, allowing the performance of simpler and more accurate behavioral studies.
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