Banca de DEFESA: FABIO TEIXEIRA DUARTE

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE: FABIO TEIXEIRA DUARTE
DATA: 30/03/2012
HORA: 14:00
LOCAL: sala de reuniões do Centro de Biociências
TÍTULO:

Proteômica diferencial da Chromobacterium violaceum em resposta ao estresse oxidativo induzido por peróxido de hidrogênio.

PALAVRAS-CHAVES:

Chromobacterium  violacuem; Estresse oxidativo; Metabolismo

PÁGINAS: 124
GRANDE ÁREA: Ciências Biológicas
ÁREA: Bioquímica
RESUMO:

Chromobacterium violaceum é um bacilo Gram-negativo, de vida livre, saprófito e patógeno oportunista que habita no solo e na água na Amazônia. Tem como característica principal a produção de um pigmento violeta,  a violaceína.  Esse pigmento possui várias aplicações farmacológicas e biotecnológicas. Devido ao grande  potencial  biotecnológico,  seu  genoma  foi  totalmente  sequenciado  em 2003.  A análise do genoma mostrou que esse organismo possui vários genes relacionados  à  aclimatação  ambiental  e  à  tolerância  ao  estresse.  O  objetivo deste  trabalho  foi  estudar  o  proteoma  diferencial  em shotgun de C. violaceum em  resposta  ao  estresse  oxidativo  provocado  por  H2O.  Para  tal, colônias de C. violaceum foram cultivadas na presença e na ausência de 8 mM de  H2O2 por  duas horas.  Após  este  período as  proteínas  totais  da  bactéria foram  extraídas  utilizando  tampão  solubilização  e  dosadas  por  Bradford. Proteínas em um total de 20 µg foram submetidas a SDS-PAGE e ao final, as proteínas foram fixadas e coradas com comassie blue. Cada coluna do gel foi cortado  em  9 pedaços,  os  quais  foram  cortados  em  tamanhos  menores  para assim serem descorados. As proteínas do gel foram então alquiladas e tiveram as  pontes  de  hidrogênio  reduzidas para,  em  seguida,  serem digeridas  pela tripsina. Os peptídeos trípticos gerados foram submetidos ao espectrômetro de massas tipo Orbitrap.  Pacotes  de  programas  de  bioinformática  auxiliaram  na interpretação  dos  espetros  detectados  e  na  definição  das  proteínas diferencialmente  expressas.  A  proteômica  de  shotgun  revelou  que C violaceum expressou 131  proteínas  exclusivamente  na  condição  controle,  177 proteínas  passaram  a  ser  expressas  sob  estresse  oxidativo  e  1175  proteínas possuem expressão  nas  duas  condições.  Análise  dos  resultados mostrou  que na  condição  de  estresse  oxidativo,  essa  bactéria  muda  sua  fisiologia, expressando  proteínas  capazes  de;  detoxicar  o  H2O,  proteger  biomoléculas, degradar  moléculas  oxidadas,  combater  ciclo  lítico,  modificar  estruturas morfológicas,  modelar  expressão  gênica,  modificar  proteínas  entre  outras. Sugere-se então, que C. violaceum possui mecanismos complexos, eficientes e versáteis  em  resposta  estresse  oxidativo.  Várias  ORFs  hipotéticas foram detectadas nesse estudo e futuramente terão suas funções caracterizadas. 

 

MEMBROS DA BANCA:
Externo ao Programa - 1513597 - JOAO PAULO MATOS SANTOS LIMA
Interno - 1149647 - LUCYMARA FASSARELLA AGNEZ LIMA
Presidente - 1199127 - SILVIA REGINA BATISTUZZO DE MEDEIROS
Externo à Instituição - THALLES BARBOSA GRANGEIRO - UFC
Interno - 1674709 - VIVIANE SOUZA DO AMARAL