Banca de DEFESA: MARIANA BORGES LOPES

Uma banca de DEFESA de DOUTORADO foi cadastrada pelo programa.
DISCENTE : MARIANA BORGES LOPES
DATA : 29/09/2020
HORA: 13:00
LOCAL: Videoconferência
TÍTULO:

REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO DE Pla2g2a ATRAVÉS DO USO DE MIMÉTICOS DE rno-miR-214-3p NA CARDIOMIOPATIA DIABÉTICA

PALAVRAS-CHAVES:

Cardiomiopatia Diabética; miRNAs miméticos; rno-miR-214-3p; Pla2g2a; Il6; terapia gênica.

PÁGINAS: 144
RESUMO:

A hiperglicemia sistêmica causada pelo diabetes leva a um processo inflamatório e disfunções cardiovasculares inclundo a a cardiomiopatia diabética (CMD). O presente estudo objetivou buscar através de análises in silico, RNAms e miRNAs diferentemente expressos na CMD e, in vitro e in vivo, validar o papel do rno-miR-214-3p através da regulação da fosfolipase A2 do grupo IIA (Pla2g2a) no processo inflamatório decorrente da hiperglicemia. Bancos de dados de microarray do Gene Expression Omnibus (GSE4745 e GSE44179) e ferramentas como Ingenuity Pathway Analysis e TargetScan 7.1 foram usados para predizer interações miRNA-RNAm relacionadas à CMD. Com isso, foi avaliada a expressão de rno-miR-214-3p, Pla2g2a e Il6 no ventrículo esquerdo (VE) ratos Wistar com diabetes induzido por estreptozotocina (40 mg/kg, i.v.) e cultura de células H9c2 em condições normoglicêmicas (NG, 5,5 mmol/L de glicose), hiperglicêmicas (25 mmol/L de glicose) e transfectadas com rno-miR-214-3p mimético em meio hiperglicêmico para validar os resultados in silico. RNA total e proteínas foram extraídos das amostras e a expressão avaliada por RT-qPCR e Western Blotting. Fibrose foi caracterizada pelo aumento da deposição de colágeno no espaço intersticial no miocárdio de ratos diabéticos (p = 0,023). A hiperglicemia reduziu a expressão do rno-miR-214-3p (p = 0,043 e p = 0,020) e aumentou de Pla2g2a (p = 0,016 e p = 0,043) e Il6 (p = 0,016 and p = 0,011) no VE dos ratos e nas células H9c2, respectivamente. A expressão das proteínas sPLA2-IIA (p = 0,011) e IL-6 (p = 0,011) também estava aumentada no VE dos ratos diabéticos. Expressão de Pla2g2a e sPLA2-IIA tiveram correlação positiva com a hiperglicemia e expressão de Il6 (p < 0,05). A transfecção de células H9c2 com mimético aumentou a expressão de rno-miR-214-3p e reduziu a expressão de Pla2g2a e Il6 em meio hiperglicêmico (mimético a 50 nM/24 h). O presente estudo confirmou nossos resultados in silico, hiperglicemia leva à redução da expressão de rno-miR-214-3p e aumento de seu gene alvo Pla2g2a. O aumento na expressão de rno-miR-214-3p reduziu a expressão de Pla2g2a e Il6, indicando que miR-214/Pla2g2a/Il6 podem ser uma via de inflamação associada ao desenvolvimento de CMD.

MEMBROS DA BANCA:
Externa à Instituição - ALICE CRISTINA RODRIGUES - USP
Externo à Instituição - ALVARO DANILO CERDA MAUREIRA - UFRO
Presidente - 2087759 - ANDRE DUCATI LUCHESSI
Interno - 2275890 - MARCELO DE SOUSA DA SILVA
Interno - 1544647 - MATHEUS DE FREITAS FERNANDES PEDROSA